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磁珠法提取用于遗传学研究的人全血基因组DNA

《医药卫生(文摘版)》2017年 第12月 03卷 | 匡澜[1] 闫旭[2] 贾健[2](通讯作者) 1.天津医科大学,天津 300070 2.天津市天津医院,天津 300210

摘 要:目的 建立一种简便的,有效的,安全的人基因组DNA提取方法,使之能够用于遗传学研究。方法:采用磁珠法和传统的酚氯仿法进行人全血基因组DNA的提取,用在260nm时的吸收光谱比较两种方法的DNA产量,并对磁珠法的实验条件进行优化。所提取的基因组DNA进行直接琼脂凝胶电泳及聚合酶链反应(PCR)。结果:1.5ml全血平均产量4.21±1.94μg,和传统的酚-氯仿法(产量5.37±0.06μg)有相同的效率(P=0.317),并得出了最佳磁珠用量。直接琼脂凝胶电泳法了解到提取的人全血基因组DNA分子量在8kp以上,且能作为模板成功地进行PCR试验。结论:本试验总结出了一套磁珠法提取人全血基因组DNA的较合理的方法,而且磁珠法提取的人全血基因组DNA是完整的,较纯净的DNA样本,可用于临床遗传学研究。

【分 类】 【生物科学】 > 遗传学
【关键词】 全血 基因组DNA 提取 磁珠法 遗传
【出 处】 《医药卫生(文摘版)》2017年 第12月 03卷 120-122页 共3页
【收 录】 中文科技期刊数据库

【参考文献】
[1] Guerrini MM, Sobacchi C, Cassani B, et al. Human osteoclast-poor osteopetrosis with hypogammaglobulinemia due to TNFRSF11A (RANK) mutations[J]. Am J Hum Genet, 2008 , 83(1):64-76.[2] LinksMunce T, Simpson R, Bowling F. Molecular characterization of Prader-Willi syndrome by real-time PCR[J]. Genet Test, 2008, 12(2):319-324.[3] 李鸿, 宋力, 党利亨, 等. Wilson 病基因突变的检测和分析[J]. 天津医药, 2008, 369(1):4-6.[4] Galicka A, Gindzieński A. Direct sequencing of PCR products for mutation detection in osteogenesis imperfecta[J]. J Appl Genet, 2002, 43(3):365-369.[5] Prodelalova J, Rittich B, Spanova A,et al.Isolation of genomic DNA using magnetic cobalt ferrite and silica particles[J]. J Chromatogr A, 2004, 1056 (1-2):43-48.[6] Archer MJ, Lin B,Wang Z, et al.Magnetic bead-based solid phase for selective extraction of genomic DNA[J].Anal Biochem,2006,355(2):285-297.

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